CONTROLLO DI QUALITA' INTERNO IN AUTOIMMUNOLOGIA PER METODICHE IMMUNOENZIMATICHE (EIA)

M. Pradella, A. Xamin, P. Clemen, P. Arslan*

Laboratorio Analisi, Ospedale di Castelfranco V.to (TV)

*Scuola di Specializzazione in Patologia Clinica, Università di Padova

Scopo del lavoro

Si intende verificare la possibilità di introdurre nel settore di Autoimmunologia le procedure del controllo di qualità interno secondo le specifiche dello standard NCCLS C24-A2, in carenza di materiali disponibili in commercio e di dati di letteratura. I materiali che finora sono stati in uso per le metodiche di immunoenzimatica (EIA) sono quelli forniti con i kit: spesso si tratta di materiali prediluiti, che non raramente hanno valori assegnati ben più alti di quelli del relativo cut-off ed intervalli di accettabilità molto ampi e che sono vincolati al lotto dei reagenti e/o substrati in uso.

Materiali e Metodi

campioni positivi di pazienti in toto o diluiti con campioni negativi, per ottenere un titolo finale vicino al valore di cut-off, suddivisi in aliquote conservate a -20 °C e sottoposti allo stesso trattamento dei campioni dei pazienti.

Risultati

Sigla

Analisi
Antigene
Unità di misura
Cut-off
Media
Mediana
Media/

cut-off
s
cv
Tendenza
Q-ACAM-1
ACA IgG
Cardiolipina
UI/mL
20
9.94
9.83
0.50
4.29
43.10
STABILE
Q-ACAM-1
ACA IgM
Cardiolipina
UI/mL
20
16.54
17.23
0.83
2.50
15.08
STABILE
Q-ACAG-1
ACA IgG
Cardiolipina
UI/mL
20
13.23
12.16
0.66
3.67
27.71
STABILE
Q-ACAG-1
ACA IgM
Cardiolipina
UI/mL
20
13.33
13.77
0.67
1.27
9.54
STABILE
Q-SSA-1
ENA Sing.
SSA/Ro
U/mL
15
133.92
137.30
8.93
8.20
6.12
STABILE
Q-SSA-2
ENA Sing.
SSA/Ro
U/mL
15
72.01
72.77
4.80
4.29
5.95
STABILE
Q-SSB-2
ENA Sing.
SSB
U/mL
15
26.74
24.64
1.78
8.67
32.43
STABILE
Q-RSm-1
ENA Sing.
Sm
U/mL
15
26.19
23.08
1.75
7.32
27.94
AUMENTO
Q-RSm-1
ENA Sing.
Sm/Rnp
U/mL
15
23.86
22.55
1.59
5.03
21.07
AUMENTO
Q-Scl-1
ENA Sing.
Scl-70
U/mL
15
23.80
25.12
1.59
6.54
27.47
STABILE
Q-Scl-2
ENA Sing.
Scl-70
U/mL
15
29.32
30.77
1.95
4.69
16.00
STABILE
Q-TTG-1
ATTG
TTG
UA
7
7.21
7.16
1.03
0.86
11.97
STABILE
Q-TTG-2
ATTG
TTG
UA
7
6.68
6.78
0.95
0.54
8.07
STABILE
Q-AGAG-1
AGA IgA
Gliadina
mg/L
3
3.73
3.89
1.24
0.58
14.62
DIMINUZIONE
Q-AGAG-1
AGA IgG
Gliadina
mg/L
18
20.28
19.70
1.13
3.19
15.75
STABILE

I coefficienti di variazione (cv) calcolati sono piccoli, molto vicini a quanto ci si attende per le metodiche di immunoenzimatica (circa 8-25%); nell'unico caso in cui si è ottenuto un cv relativamente alto (43 %) la concentrazione media di autoanticorpi è molto bassa.

La maggior parte dei materiali appare stabile nel tempo; nei casi ove vi sono tendenze all'aumento od alla diminuzione dei valori misurati, queste risultano comunque di entità limitata e non tali da modificare l'imprecisione dei risultati. La distribuzione dei risultati è abbastanza simmetrica. I valori medi ottenuti con i materiali preparati risultano in molti casi vicini ai cut-off dell'analisi.

Conclusioni

E' possibile preparare materiali di controllo conformi ai criteri di NCCLS C24-A2 ed utili per applicare le comuni regole di controllo statistico. L'operazione ha un certo costo, dovuto soprattutto al tempo dell'operatore. Essi hanno alcuni vantaggi: sono identici ai campioni dei pazienti e valori molto vicini ai livelli decisionali, consentono di rilevare eventuali differenze tra lotti diversi dei reagenti e/o substrati.